2mol/L鹽酸溶液:量取濃鹽酸l6.7mL加蒸餾水至l00mL,搖勻。
0. Olmol/L鹽酸溶液: 量取2mol/L的識酸50rnL 加素銷水至l0'o,omL, 搖勻 。
lo% (:m/v)三氣化鐵溶液;稱取三氯化鐵loog,用少量燕餾水溶解過進,加濃鹽酸6,mL,加蒸餾水至800mL,加2mol/L的鹽酸至l000:mL,)
0.5,% (m/V)三氯化鐵溶液:量取l0%三氣化鐵溶液,5,0mL、2:,:nol/L鹽酸50mL,加素榴水至1ooOmL,揺勻。
l000U/mL_:上霉素標(biāo)準(zhǔn)液:稱取已知 U/m,g (生物效價)土霉素標(biāo)準(zhǔn)品,加2:'nol/L鹽酸4:mI_,溶解完全后(約5rnin),加蒸餾本室200mL,放冰箱各用。
 
【實驗方法與步,躲]
l?土.●意效ffi'的a定
(1)土霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:用土霉素標(biāo)準(zhǔn)樣配成l000U/mL的標(biāo)準(zhǔn)液,用2:rnL移液
管分別取標(biāo)準(zhǔn)液 0,4,mL、 0.3mL、1,0mL、l.2mI_、l.4mL. l,6mL、l.3ml. f試管中, 加 0. 01moi/L的鹽酸至lOmL,再加 0‘:5,%的三氣化鐵瀋液lOmL,揺勻,靜置20,rnin;另取樣同上,加 0,0lmol/L的鹽酸至2,0r,rnL,搖勻, 作為空白對照,在4,80nrn 的波長下'測定吸光度值? 以土霉素數(shù)價為縱坐標(biāo)、 以吸光度值為積坐標(biāo)繪制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(2) 發(fā)醇液數(shù)價的構(gòu)定: 吸取注液稀釋適宜倍數(shù) (使iiilf構(gòu)后數(shù)價在標(biāo)準(zhǔn)曲線范國內(nèi)) , 用移液管取l:rnLi開器液于試管中, 準(zhǔn)確加人 0. Olmiol/L的鹽酸至lOmL, 再加入 o, 5%的三報化鐵溶液lOmL,搖勻,放置20mi:n,另取1mL締釋液?加入 0.0lmol/L的鹽酸至20,rnL,搖勻,作為空自對照, 構(gòu)定48,0n,rnL波長下的吸光度值,與標(biāo)準(zhǔn)曲線對比,得到發(fā)醇液中土零素數(shù)價。                          2.土●意投8液a化及除金●青子
( 1 ) 取適量發(fā)醇液, 按發(fā)醇液數(shù)價的測定方法測出發(fā)酵液效價 。
(2)取一定」體積發(fā)酵液,邊攪拌邊加人黃血鹽o.35% (;",/V)、硫酸鋅o.2% (,開/V), 并加入乙二酸酸化發(fā)開至pH1, 6一一,2.0,:攪il半30,nin后,取酸化上清液,按發(fā)醇液效價的測定方法測定其效價并計算酸化收率。
(3)將酸化的發(fā)酵液稀群l倍,用真空抽油裝置進行過濾, 油餅再用乙二酸椿液沖:沈, 測出雄液的體積。按發(fā)醇液數(shù)價的調(diào)定方法測定其效價并計算過濾收率。

效價計算; 將測定的吸光,度值代人標(biāo)準(zhǔn)曲線方程, 再乘以稀樣倍數(shù)即得效價。 收率計算: 收率=效價 X樣品體積/上步數(shù)價 X上步樣品簡 a
【注意事項】
( l):測;定樣品 pH時, 樣品不宜在室溫下放置時問過長, .應(yīng)當(dāng)在取樣2mLi,i 之內(nèi)消定完, 不能直接測定的樣品應(yīng):收樣放人冰箱, 如需測定時提前從冰箱中取出放至室溫測定 。
(2) 測定樣品 p,H后應(yīng)該用純事本沖洗電極, 不用時應(yīng)將電扱置T?飽和報化鉀溶液中 D
(3)進行酸化和鐵離子的去除時,操作要在恒溫進行,以免土霉素活性發(fā)生變化E .
(4)撹#時要注意轉(zhuǎn)速不實過快,以免將報接沉淀破壞,影■ii后續(xù)過1iaa
 

【思考題】

l,改變發(fā)前過雄特性的方法有哪些'?簡述其機理。
2,在實驗;iit程中為什么要一直演定土奪素的效價和收率'? www.cdymmx.com
 

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